川芎(Ligusticumchuanxiong)

川芎(Ligusticumchuanxiong)，咖啡性温味辛。酸和酸为素现代药理研究表明，阿魏川芎具有保护心脑血管、指标制因抗肿瘤、从不川芎抗炎、同炮探究抗氧化、角度酒炙机理神经保护等活性，咖啡主要含有苯酞类、酸和酸为素生物碱类、阿魏有机酚酸类及其酯类、指标制因多糖类等成分。从不川芎咖啡酸、同炮探究阿魏酸均是角度酒炙机理有机酚酸类化合物的代表，其中阿魏酸是咖啡中国药典中作为川芎质量控制的指标成分。川芎的炮制历史悠久，据本草考证，酒炙川芎自宋代以来一直沿用至今，酒炙能引药上行，增强川芎活血行气、散瘀止痛的作用。本研究通过辅料黄酒、炒制时间以及加热因素三方面探讨酒炙对川芎中咖啡酸和阿魏酸含量的影响，为川芎酒炙机理的研究及酒炙川芎质量标准的制订提供科学依据。因黄酒中含有一定量的乙醇和水，而且有研究者认为酒炙后部分成分含量升高是由于乙醇提高了这些成分的溶出度，故在探讨辅料黄酒的影响时，本实验采用不同浓度的乙醇和水代替黄酒进行炮制，同等条件下测定咖啡酸和阿魏酸的含量，从黄酒中乙醇和水的影响方面探讨川芎酒炙机理。

1仪器与材料

1.1仪器

RIGOLL-3000型高效液相色谱仪(苏州普源精电有限公司，包括L-3500检测器、L-3245四元泵、L-3320自动进样器和L-3400柱温箱)；EX225D十万分之一电子天平(奥豪斯仪器(上海)有限公司)。

1.2材料

咖啡酸、阿魏酸购自中国食品药品检定研究院质量分数>99.0%(批号分别为110885-200102、110773-201614)；雕王黄酒(批号：GBIT13662，绍兴吴越酿酒有限公司，酒精度：12%)；甲醇、乙腈为色谱纯。

2方法与结果

2.1色谱条件与系统适应性

色谱柱：CompassC18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B)，梯度洗脱(0～5min，20%～30%A；5～10min，30%～40%A；10～10.1min，40%～90%A；10.1～20min，90%A；20～20.1min，90%～20%A；20.1～30min，20%A)；柱温：30℃，检测波长：323nm，流速：1.0mL/min，进样量：10µL。系统适用性符合要求。具体色谱图见图1。

2.2川芎炮制品的制备

酒炙川芎：取川芎饮片约100g，加入黄酒拌匀，闷润至酒尽药透并分为7份，其中1份不经过加热炒制，在室温晾干，其余6份在100℃下分别炒制5、10、15、20、25、30min，制得CX-J-ZRLG、CX-J-5min、CX-J-10min、CX-J-15min、CX-J-20min、CX-J-25min、CX-J-30min的川芎样品。

“醇炙”川芎：取川芎饮片约100g，分为6份，根据不同酒中乙醇的含量，分别加入10%、20%、30%、40%、50%、60%的乙醇拌匀，闷润至“醇尽”药透。将不同浓度乙醇润透的川芎饮片再分为2份，1份在室温下自然晾干，分别制得CX-10%C-ZRLG、CX-20%C-ZRLG、CX-30%C-ZRLG、CX-40%C-ZRLG、CX-50%C-ZRLG、CX-60%C-ZRLG的川芎样品，另1份在100℃下炒制20min，分别制得CX-10%C-20min、CX-20%C-20min、CX-30%C-20min、CX-40%C-20min、CX-50%C-20min、CX-60%C-20min的川芎样品。

水润川芎：取川芎饮片约100g，经水润透，分为4份，分别炒制5，10，15，20min，制得CX-S-5min，CX-S-10min，CX-S-15min，CX-S-20min的川芎样品。

各川芎样品粉碎(过4号筛)备用。

2.3对照品溶液的制备

精密称取咖啡酸、阿魏酸对照品分别为1.70mg、2.52mg，制备对照品储备液。精密量取两种储备液适量，稀释，最终得咖啡酸、阿魏酸浓度分别为34µg/mL和252µg/mL的混合对照品溶液。

2.4供试品溶液的制备

采用超声提取法。取各川芎粉末约3.0g，精密称定，置于锥形瓶中，加入10mL甲醇，超声提取20min，过滤，取上清液。重复共提取3次，合并上清液并转移至50mL容量瓶中用甲醇定容。进样前在13000r/min下离心20min，取上清液，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得。

2.5线性关系考察

将混合对照品溶液，甲醇逐级稀释，得系列标准溶液(hb1～5)。咖啡酸和阿魏酸的回归方程分别为：Y=46.122X-1.8769，r=0.9991；Y=51.712X-28.342，r=0.9990。两成分分别在2.125～34µg/mL、15.750～252µg/mL范围内线性关系良好。

2.6精密度试验

取混合对照品溶液(hb3)连续进样6次，记录峰面积。两成分峰面积的RSD分别为0.7%，0.4%，表明仪器精密度良好。

2.7稳定性试验

将样品CX-SP分别于制备后0，2，4，6，8，12，24h进样。两成分峰面积的RSD分别为3.9%，1.1%。表明供试品溶液在24h内稳定。

2.8重复性试验

将样品CX-SP重复制备共6份，进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算两种成分的含量。两成分的的平均含量分别为0.080mg/g，0.451mg/g，含量的RSD分别为2.6%，2.8%，表明该方法重复性良好。

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