可表现出毒性相加作用

发布时间：2025-07-29 13:26:07 来源：雙友網 作者：时尚秀场

糕点是固相高效深受人们喜欢的一种食品，它以面粉、液相米粉、色谱时测糖、法同蛋、定糕点中的研乳制品、种添油脂等为主要原料，加剂究配以多种辅料、固相高效馅料、液相调味品经过一定工艺制作而成，色谱时测为了提高糕点的法同外观、口感及延长食品的定糕点中的研防腐保质期，商家往往会添加一些食品添加剂，种添以此增加糕点的加剂究商业价值，有研究发现有些食品添加剂在混合使用时可能会产生联合毒性作用，固相高效比如糖精钠、柠檬黄分别与苯甲酸钠联合作用于L-929细胞中，可表现出毒性相加作用，因此，在GB2760-2014《食品添加剂使用标准》中明确规定糕点等食品使用添加剂的限量。

目前，国内外食品添加剂多组分同时检测的方法主要有高效液相色谱法、液相色谱一质谱法、离子色谱法、气相色谱法等，由于液相色谱一质谱法仪器昂贵，样品基质对分析成分以及仪器影响都较大，离子色谱法以及气相色谱法对样品前处理要求比较高，且柠檬黄、诱惑红等人工合成色素采用离子色谱法难处理，防腐剂和甜味剂等添加剂的前处理方法不同，采用气相色谱法检测，前处理复杂，同时也会使样品的提取效率低，回收偏低，已不能满足分析需要，虽然高效液相色谱法的通用性会造成部分人工合成色素以及防腐剂出现假阳性，但是可以通过PAD光谱对照品与假阳性样品进行比对确认，因此，鉴于上述情况，通过试验建立一种能够同时检测糕点中多种食品添加剂的检测方法显得十分必要。

本研究主要是针对糕点中的新红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸、纳他霉素、富马酸二甲酯等13种食品添加剂同时检测，采用液相色谱法进行检测，优化前处理方法以及色谱条件，对常见的人工合成色素、防腐剂以及甜味剂在糕点的检测应用中实现同时检测，提高检测效率，降低检测成本，完善食品检验方法，有助于在食品检验中进行推广。

一、材料与方法

1、材料与试剂

样品来源：分别购于南宁市糕点店（3家）及超市（2家）共计8个批次；

试剂：甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）均为默克股份两合公司；乙酸铵（优级纯）：厂家为上海麦克林生化有限公司；亚铁氰化钾（分析纯）、乙酸锌（分析纯）：厂家均为国药集团有限公司；

固相萃取小柱QasisWAX：厂家为Waters公司；微孔滤膜：0.45ktmGHP，厂家为Waters公司。

对照品的来源：新红批号G119769，含量88.9％、胭脂红批号146544，含量89.8％、亮蓝批号125123，含量91.6％、赤藓红批号171572，含量86％、靛蓝批号B0003270，含量90％、El落黄批号136871，含量90.5％、山梨酸批号50112，含量99.0％均由Dr．EhrenstroferGrnbH提供；脱氢乙酸批号80430100，含量99.0％、富马酸二甲酯批号B0003190，含量99.9％、糖精钠批号201501，含量100％ANPEL提供；苯甲酸批号21228，含量99.9％、纳他霉素批号B0002455，99％由Bepure提供。

仪器：Waterse2695高效液相色谱仪带PDA2998检测器美国Waters公司lUNIVERSAL320R低温离心机；Multivap氮吹仪；MilIi-QA10纯水机Millipore公司。

2、方法

（1）对照品储备溶液的制备

精密称取新红、胭脂红、亮蓝、赤藓红、靛蓝、日落黄、诱惑红38.25mg、12.45mg、12.77mg、25.53mg、11.17mg、34.80mg、10.76mg分别置50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，得到7种人工合成色素浓度分别为：0.6801mg/mL、0.2236mg/mL、0.2339mg/mL、0.4391mg/mL、0.2011mg/mL、0.6299mg/mL、0.1857mg/mL；又分别精密称取脱氢乙酸、苯甲酸、山梨酸、纳他霉素、对照品27.88mg、18.19mg、11.45mg、10.00mg、11.78mg分别置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到4种防腐剂浓度分别为：0.5520mg/mL、0.3636mg/mL、0.2267mg/mL、0.1980mg/mL；精密称取糖精钠对照品11.78mg置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到1种甜味剂浓度为：0.2356mg/mL；精密称取富马酸二甲酯对照品10.29mg置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到浓度为1.0280mg/mL。

（2）标准混合使用液的配制

精密量取精密称取新红、胭脂红、亮蓝、赤藓红、靛蓝、日落黄、诱惑红38.25mg、12.45mg、12.77mg、25.53mg、11.17mg、34.80mg、10.76mg分别置50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，得到7种人工合成色素浓度分别为：0.6801mg/mL、0.2236mg/mL、0.2339mg/mL、0.4391mg/mL、0.2011mg/mL、0.6299mg/mL、0.1857mg/mL；又分别精密称取脱氢乙酸、苯甲酸、山梨酸、纳他霉素、对照品27.88mg、18.19mg、11.45mg、10.00mg、11.78mg分别置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到4种防腐剂浓度分别为：0.5520mg/mL、0.3636mg/mL、0.2267mg/mL、0.1980mg/mL。

精密称取糖精钠对照品11.78mg置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到1种甜味剂浓度为：0.2356mg/mL；精密称取富马酸二甲酯对照品10.29mg置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到浓度为1.0280mg/mL对照品储备溶液中的日落黄、新红0.4mL，糖精钠、亮蓝、诱惑红、靛蓝、胭脂红、山梨酸、纳他霉素各取1.0mL，赤藓红0.7mL，脱氢乙酸0.5mL，苯甲酸取0.03mL，富马酸二甲酯取0.25mL置同一25mL容量瓶中，摇匀，加水稀释至刻度。

（3）标准线性的配制

取精密量取精密称取新红、胭脂红、亮蓝、赤藓红、靛蓝、日落黄、诱惑红38.25mg、12.45mg、12.77mg、25.53mg、11.17mg、34.80mg、10.76mg分别置50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，得到7种人工合成色素浓度分别为：0.6801mg/mL、0.2236mg/mL、0.2339mg/mL、0.4391mg/mL、0.2011mg/mL、0.6299mg/mL、0.1857mg/mL；又分别精密称取脱氢乙酸、苯甲酸、山梨酸、纳他霉素、对照品27.88mg、18.19mg、11.45mg、10.00mg、11.78mg分别置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到4种防腐剂浓度分别为：0.5520mg/mL、0.3636mg/mL、0.2267mg/mL、0.1980mg/mL。

精密称取糖精钠对照品11.78mg置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到1种甜味剂浓度为：0.2356mg/mL；精密称取富马酸二甲酯对照品10.29mg置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到浓度为1.0280mg/mL对照品储备溶液中的日落黄、新红0.4mL，糖精钠、亮蓝、诱惑红、靛蓝、胭脂红、山梨酸、纳他霉素各取1.0mL，赤藓红0.7mL，脱氢乙酸0.5mL，苯甲酸取0.03mL，富马酸二甲酯取0.25mL置同一25mL容量瓶中，摇匀，加水稀释至刻度的标准混合使用液0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、2.5mL分别置5mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得标准系列1～5的标准混合使用液。

（4）样品的制备

称取粉碎均匀的糕点样品2.5g置50mL离心管中，加25mL水，各加5mL106g/L亚铁氰化钾溶液和5mL219g/L乙酸锌溶液，涡旋10min后，加水定容至50mL，经10000r/min冷冻离心10min后取出，量取上清液5mL过QasisWAX固相萃取小柱（预先经3mL甲醇以及3mL水活化），弃去流出液，依次用6mL2％甲酸和6mL纯化水清洗，再用5％氨化甲醇洗脱并收集于15mL离心管中，在40℃水浴中氮吹至近干后取出放置室温，用5mL水复溶残渣，过0.45μmGHP微孔滤膜后，待测。

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